Родился в Альби. Франция. Работал и жил в Париже.

​

В раннем возрасте Тулуз-Лотрек уехал жить к матери в Париж, где начал рисовать. В семье поняли, что мальчик может быть талантливым художником, поэтому друг отца, художник  Рене Принсто дал несколько уроков юному Анри.
После того, как Принсто заметил навыки Тулуз-Лотрека, он убедил родителей Анри позволить ему вернуться в Париж и учиться у художника Леона Бонна. Тулуз-Лотрек переехал на Монмартр и прожил там почти всю свою жизнь. 

После того, как Бонна закрыл свою студию, Анри перешел в студию художника Фернана Кормона, где он провел следующие пять лет, изучая живопись и общаясь с группой друзей, таких как Эмиль Бернар и Винсент Ван Гог. 

В 1885 году Лотрек начал выставлять свои работы в кабаре Аристида Брюана.

После учебы он участвовал в выставке в Тулузе, а затем выставлялся в Париже вместе с друзьями Ван Гогом и Луи Анкетеном.

Когда открылось кабаре «Мулен Руж», Тулуз-Лотреку было поручено изготовить серию плакатов. Его мать уехала из Парижа, и, хотя у него был регулярный доход от семьи, изготовление плакатов предлагало ему средства к существованию. 

Тулуз-Лотрек поехал в Лондон, где компания J. & E. Bella поручила ему сделать плакат, рекламирующий их бумажное конфетти, и рекламу велосипеда.

Он стал выдающимся художником-постимпрессионистом, иллюстратором в стиле модерн и литографом.

​

Тулуз-Лотрек умер 9 сентября 1901 года.